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前白蛋白cDNA的克隆及稳定转染细胞株的建立

李曼妮 章芳 苏先狮

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前白蛋白cDNA的克隆及稳定转染细胞株的建立

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  • 中图分类号: R346

Cloning of prealbumin cDNA and construction of the stable transfective cell line

  • 摘要: 建立真核表达重组体 pCDNA3 1(+) -PA的稳定转染细胞株。以人胚肝组织总RNA为模板通过RT-PCR获取全长PAcDNA。先将该序列克隆到 pGEM -TEasy载体 ,再亚克隆转入pCDNA3 1(+) ,限制性内切酶消化及DNA序列分析鉴定重组体构建正确后 ,用脂质体转染技术把它导入Hela细胞 ,经G4 18筛选建立稳定转染细胞株 ,真核表达重组体 pCDNA3 1(+) -PA构建成功 ,稳定转染细胞株中有PAcDNA表达。稳定转染细胞株的成功建立为进一步生产PA的基因工程产品奠定基础

     

  • [1]ShujiM , ShuichiroM , KazunoriS .CloningandsequenceanalysisofcDNAforhumanprealbumin[J].JBiolChem, 1985, 263 (18) ∶8598-8603.
    [2]J·萨姆布鲁克等著金冬雁等译《分子克隆实验指南》[M].第二版北京∶科学出版社, 1992
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  • 出版日期:  2002-04-20
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