干细胞的分类及特性
干细胞按分化潜能的大小基本分为三种类型，包括全能干细胞（Totipotent Stem Cell）、多能性干细胞（Pluripotent Stem Cell）和单能干细胞（Unipotent Stem Cell）。按个体发育中干细胞出现的次序和发育潜能分为：胚胎干细胞和成体干细胞。按其组织发生的名称可分为胚胎干细胞、造血干细胞、神经干细胞、骨髓间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cell，MSC）、胰腺干细胞等。
大量研究证明干细胞不仅可分化为中胚层细胞，还可分化为内胚层及外胚层细胞，表明干细胞可以跨系、跨胚层分化，具有强大的可塑性。同时，干细胞具有化学趋向性。根据干细胞的这些特性，临床可将之用于治疗各种细胞或组织损伤性疾病，如肝硬化、溃疡性结肠炎等。
由于胚胎干细胞存在伦理学、导致畸胎瘤及免疫排斥等因素的影响，其在临床的应用受到了限制。而成体干细胞是存在于胎儿和成体不同组织内的多潜能干细胞，具有自我复制能力，能够发挥生理性的细胞更新和修复组织损伤的作用。并且成体干细胞具有以下优点：①获取相对容易；②源于患者自身的成体干细胞在应用时不存在组织相容性问题，避免了移植排斥反应和使用免疫抑制剂；③理论上，成体干细胞致瘤风险低，所受伦理学争议较少；④成体干细胞还具有多向分化潜能。因此，这类细胞为临床细胞移植治疗开辟了新的途径和思路，目前应用于临床的热点干细胞包括：外周血干细胞和骨髓血干细胞。由于脐血T细胞在单个核细胞中的比例显著低于成人外周血，而且所含功能不成熟的淋巴细胞其抗原性弱，在一般情况下不会产生严重的抗宿主反应，故脐带血干细胞也成为近年来的研究热点。
干细胞分化为肝细胞的基础研究
大量的基础研究证实骨髓MSC在体内也可向肝细胞分化，参与肝损伤的修复。在慢性肝病中已有较多实验证实了MSC治疗的有效性，Petersen等以CCl4制造大鼠肝衰竭模型，并以2-乙酰氨基芴阻断受体鼠自身肝细胞增殖，通过三种途径追踪移植的骨髓细胞：①将雄性大鼠骨髓移植到受致死量照射的同系雌鼠体内后，用DNA探针检测Y染色体的sry区来分辨受体肝脏中供体来源的细胞；②将二肽基肽酶Ⅳ阳性（DPPIV +）的雄性大鼠的骨髓移植到DPPIV -的同系雌鼠体内，检测受体肝内表达DPPIV的细胞；③将表达L21-6抗原的Lewis大鼠作为受体，不表达该抗原的同种异体Brown- Norway大鼠作为供体进行全肝移植，检测移植肝中L21-6+细胞。通过以上三种途径证实肝卵圆细胞的骨髓源性。Oyagi等在体外将MSC和肝细胞生长因子（HGF）共同培养2周，然后将其注入CCl4致肝损伤的大鼠体内，4 周后检测到体内白蛋白水平仍稳定，转氨酶水平和纤维化程度均下降，肯定了HGF诱导后MSC在体内的治疗作用。进一步的研究提示，MSC可逆转肝纤维化，其机制可能与其分泌HGF，而后者可进一步诱导肝细胞增殖，并可促进基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase， MMP）表达，下调转化生长因子β1（Transforming Growth Factor Beta 1， TGF-β1）表达有关。另有研究认为，Liv-8阴性、Thy-1阳性的骨髓干细胞在体内外均可转化为肝系细胞。有报道成体骨髓MSC移植可以治疗延胡索酰乙酰乙酸水解酶阴性小鼠（FAH-/-），结果发现，移植后的缺陷鼠肝脏几乎被正常的肝细胞完全取代。
干细胞原位肝内移植治疗肝硬化的临床研究
前期大量的动物实验结果表明，移植的干细胞部分定植于肝脏并分化为肝细胞，增加了肝细胞数量，肝功能明显改善。目前，国内外已经初步将该技术应用于临床。Terai等将自体骨髓血干细胞通过外周静脉输注给9例肝硬化患者，在移植24周后，发现患者的血清白蛋白、总蛋白水平以及 Child-Pugh分级明显改善（P＜0.05），并且未观察到任何副作用。日本Lyra等进行的一项随机对照非盲临床试验首次对等待肝移植的30例晚期肝硬化患者通过肝动脉途径进行了自体骨髓干细胞移植。干预组接受自体骨髓干细胞移植，对照组给予安慰剂，随访90天后，移植组16%的患者血清白蛋白水平显著升高，而对照组仅有2%患者白蛋白水平升高；同时，移植组Child-Pugh评分比基线水平降低8%，而对照组比基线水平升高4%，国际标准化比值两组间无显著差别。郭晓钟等通过肝动脉途径进行了78例自体骨髓干细胞移植的自身对照研究，结果表明，移植后4周，患者血浆白蛋白水平显著升高（P＜0.01），凝血酶原时间明显缩短
（P＜0.01），纤维蛋白原明显降低（P＜0.01），证明骨髓干细胞移植是治疗失代偿期肝硬化患者安全、有效的方法。
我们采用外周血干细胞、骨髓血干细胞及脐带血干细胞进行原位肝内移植治疗肝硬化。治疗4周后，血浆白蛋白与移植前相比明显升高（P＜0.01）； 凝血酶原时间与移植前相比明显缩短（P＜0.01）。同时，我们对三种干细胞移植治疗前后的实验数据进行统计后发现，脐血干细胞与骨髓血干细胞移植治疗效果优于外周血干细胞移植治疗，而且对于重症肝炎患者，可联合人工肝进行治疗。我们利用脐带血干细胞治疗3例重症肝炎患者，均取得了较好的效果。在应用脐带血干细胞移植治疗肝硬化的过程中未发生任何宿主抗移植物反应，也无明显不良反应，证明脐带血干细胞移植的安全性很好。我们对113例肝硬化患者进行的干细胞移植治疗的研究结果表明，移植了干细胞的终末期肝病患者肝功能得到明显改善、生活质量得到显著提高。更为重要的是，治疗过程中未发现相关并发症，临床安全性和有效性得到了初步肯定。
问题与展望
虽然目前已经开展了大量的关于干细胞的研究，但仍有很多问题亟待解决，例如：①干细胞的识别、分离、增殖、高效诱导分化等核心技术问题；②干细胞移植治疗的具体机制；③干细胞如何到达不同的靶目标，并分化为正确的细胞；④干细胞治疗各种细胞损伤性疾病的最佳细胞量和最佳适应证等。这些问题都需要我们进一步深入研究。
目前，我国已将干细胞的研究列入了“863”、“973”等国家重点科研项目，并加强了干细胞基础和临床应用方面的资金投入，为我们在干细胞的应用及研究方面提供了更大的发展空间。
