肝内胆管癌（ICC）具有高度恶性的特征，其全球发病率预计在过去几十年中持续上升。然而，ICC发病与进展的机制仍不清楚。

2026年4月，南京大学王雷，海军军医大学沈锋和Wang Kui共同通讯在Hepatology 在线发表题为“Tumor microenvironment heterogeneity and progression mechanisms in intrahepatic cholangiocarcinoma: A study based on single-cell and spatial transcriptomic sequencing”的研究论文。该研究的训练队列包括12例未经治疗的ICC样本的单细胞测序和4例ICC样本的空间转录组学。验证队列包括87例ICC肿瘤样本的RNA-seq数据。最后，作者通过多重免疫荧光、类器官以及体内外小鼠模型验证了作者的发现。作者发现ICC患者的肿瘤微环境中存在显著异质性。ICC细胞被分为5种分子亚型，作者揭示天冬氨酸β-羟化酶（ASPH）是侵袭亚型的标志基因。随后作者筛选出千金藤素作为ASPH抑制剂，它能有效抑制肿瘤进展。 关于ICC的淋巴转移机制，作者发现N1淋巴结中的肿瘤细胞高表达肿瘤特异性主要组织相容性复合体II类分子，但缺乏共刺激因子CD80/CD86，从而诱导CD4+ T细胞进入无能状态，这可能促进ICC的免疫逃逸。综上，ICC的肿瘤微环境具有异质性。ASPH显著增强ICC的侵袭能力。ASPH抑制剂千金藤素能显著抑制ICC进展，可能作为ICC的靶向治疗药物。N1淋巴结中的肿瘤细胞表现出肿瘤特异性主要组织相容性复合体II类分子的高表达，但共刺激因子（如CD80/CD86）的沉默会诱导CD4+ T细胞进入无能状态。该研究表明，ASPH和主要组织相容性复合体II类分子可能成为ICC的新型治疗靶点。 肝内胆管癌（ICC）是第二常见的原发性肝脏恶性肿瘤，其全球发病率预计在过去几十年中持续上升。然而，大多数ICC患者无法识别出明确的危险因素。高通量测序已在不同层面揭示了ICC的免疫景观，由此产生的靶向治疗药物已使ICC患者获益，例如FGFR2抑制剂培米加替尼和IDH1/IDH2抑制剂艾伏尼布。近年来，单细胞测序技术被用于表征肿瘤异质性、肿瘤微环境（TME）和细胞间相互作用。多项研究已利用该技术证实了ICC肿瘤细胞的高度异质性。Zhang等人首次在单细胞水平报道了ICC的异质性。Song等人鉴定出S100P和SPP1作为肝门部大胆管型和外周小胆管型ICC的标志物。在ICC的TME中，Treg细胞的高活性和CD8+ T效应细胞的功能低下可能与ICC的不良预后相关。 通过高通量和单细胞测序，作者更深入地揭示了ICC的TME。作者发现CD8+ T细胞的分化可分为三个不同的阶段，且N1淋巴结中的CD8+ T细胞表现出高氨基酸代谢活性。ICC肿瘤细胞可分为五种亚型：血管生成型、代谢型、侵袭型、互补型和抑制型。ASPH的表达显著增强了ICC的侵袭能力。在大规模药物筛选中，作者鉴定出千金藤素（CEP）作为ASPH抑制剂。此外，CEP在ICC类器官和小鼠模型中有效抑制了ICC进展。进一步地，作者深入探讨了ICC淋巴结转移相关的免疫逃逸机制，揭示了Treg_FOXP3 T细胞和SPP1+ TAMs浸润到N1淋巴结中，将TME塑造成免疫抑制状态。

N1淋巴结中的肿瘤细胞高表达肿瘤特异性MHC-II分子，但缺乏CD80/CD86等共刺激因子，从而诱导CD4+ T细胞进入无能状态。此外，N1淋巴结肿瘤细胞中多个免疫检查点分子（包括CD276、LGALS9和TNFRSF14）的表达升高，可能有助于免疫逃逸。该研究代表了对ICC异质性和淋巴结转移相关免疫逃逸机制的多方面探索。该研究的发现可能为指导开发新的ICC患者合理治疗策略提供依据。

摘译自LI F, LI Y, WANG L, et al. Tumor microenvironment heterogeneity and progression mechanisms in intrahepatic cholangiocarcinoma: A study based on single-cell and spatial transcriptomic sequencing[J]. Hepatology, 2026. DOI: 10.1097/HEP.0000000000001423. [Epub ahead of print] 

转自 iNature