随着慢性乙型肝炎抗病毒治疗方案在临床上的广泛应用，对于一个慢性乙型肝炎的患者来说，无论是在决定何时开始抗病治疗，还是在治疗过程中的疗效监测、治疗方案的改变、何时停药及停药后复发的预测方面，都会紧紧依靠病毒及其相关抗原表的检测，也就是说病毒及其血清学的检测指导者治疗患者的选择和RGT治疗策略。那么如何选择治疗时机和如何应用RGT治疗策略与检测结果密切相关。
　　一、病毒及其血清学检测与抗病毒治疗的时机
　　1、HBV DNA 定量检测：目前在临床上应用的HBV DNA定量检测均为Real-time PCR方法，标准的检测结果应该下线在15-60IU/ml，而检测范围至少应该在8log。但由于采用的标准品不同、所用的DNA提取方法不同、应用的Tag酶不同等原因，是检测的灵敏度、线性范围、定量单位及可重复性有很大差别，严重地影响了临床患者治疗时机的选择和疗效观察。如对于一些HBsAg阳性且ALT升高（没有其他原因可以解释），但HBV DNA阴性，特别是一些肝硬化的患者，就会厌恶抗病毒治疗的时机。另外，如果检测的重复性好，当患者的HBV DBA有明显下降且ALT升高（即使轻度升高），也可能代表该患者已经进入了免疫清除期，及应该开始治疗。
　　2、HBsAg是HBV S基因表达的一种病毒包膜蛋白质，尽管其本身没有传染性，由于它是HBV感染后最先出现在血清中的病毒抗原，且它的水平与组织中HBV 复制模板cccDNA水平有一定的相关性。因此，HBsAg的检测无论是在HBV感染的诊断方面，还是在抗病毒治疗的疗效监测方面都有重要意义，特别是HBsAg的定量检测在抗病毒治疗疗效的判定上更精确，同时可以根据HBsAg的下降速度及幅度来确定疗程及治疗终点。目前在临床上已经广泛应用的S抗原定量检测，IU/ML来表示，直接检测范围0.05-250，稀释后最高检测范围可达12，500IU，已经基本可以满足临床治疗的需要。要想完成HBsAg定量检测必须满足以下条件：采用自动分析系统，有可溯源的标准品，测定结果与标准品之间有线性关系。目前在临床上普遍应用且有商品化试剂盒的HBsAg定量检验方法包括：Elecsys?II（罗氏诊断）和Architect（雅培公司，Architect HBsAg (QT)。在我国临床上广泛应用的主要是雅培公司Architect的方法，它的检测范围是0-250IU/ml，如果样本值>250IU/mL，则需要对标本进行稀释，稀释系数自动计算稀释前样本的浓度。而用Elecsys? HBsAg II方法定量检测HBsAg特异性和敏感性均较高，线性范围更大，同时通过双重表位捕捉模式，还可检测所有已知的HBsAg变异位点。研究显示，对于免疫耐受期的患者绝大多数s抗原的定量水平>5log， 而进入免疫清除期的患者，s抗原会在相对较低的水平（3-4log）.。因此，结合患者的年龄、ALT、HBV DNA 和s抗原的定量水平，可以更加准确地确定患者已经进入了免疫清除期而看是进行抗病毒治疗。
　　因此，治疗前病毒和s抗原定量水平的高低对于判断患者是否已经进入免疫清除期及选择药物的种类都有很大的帮助，
　　二、病毒及其血清学检测与疗效评价
　　对乙型肝炎来说目前已经被广泛接受的评价抗病毒治疗即时疗效指标主要是指病毒学和血清学应答指标，即HBV下降，特别是降低到检测不到的水平（15-60IU/ml），HBeAg的消失或血清转换，HBsAg的消失或血清转换等。
　　1、病毒学应答：即检测治疗前、治疗后不同时间点血清中HBV DNA定量水平。因为血清中HBV DNA的水平直接反应肝组织病毒被抑制的程度，也就是说血清中HBV DNA下降的程度和速度是抗病毒疗效的最直接指标，抗病毒治疗后病毒水平下降的越快、越低，说明患者对药物的疗效越好，对于NAs类药物来说，越不容易出现耐药。同时在治疗的不同时间点HBV DNA下降的速度和幅度在决定治疗的策略方面更是致关重要。治疗过程中定期检测血清中DNA的水平（一般至少每3个月检测一次）是最直接和可靠的指标。DNA的检测不但可以直接监测疗效，同时早期的病毒学应答还可以预测长期疗效，包括DNA的持续阴转、e抗原的血清转换率及组织学改善，此外还可以用DNA的反弹来检测耐药的发生。如果应用的是NAs进行治疗，首先应在治疗12周后根据患者HBV DNA的水平来判断患者是否是初始治疗失败，然后以治疗24周时HBV DNA 的水平作为早期预测疗效的指标。但值得注意的是可靠的DNA检测方法必须要灵敏、特异，同时检测域值越低越好，检测范围必须超过5log值。如果采用的方法不够灵敏、特异性不强、检测范围广、或重复性不好，可以误导临床治疗，导致病毒耐药反弹等等。
　　2、血清学应答：血清学应答包括e抗原消失及血清转换（e抗原阳性慢乙肝）、s抗原消失及/或血清转换。经过治疗出现e抗原消失或e抗原血清转换后，标志着疾病缓解、组织学改善，同时肝硬化和肝细胞癌的发生率均大大降低，且停药后的复发率也会明显减少。而s抗原消失及/或血清转换是临床上最接近治愈的指标。
　　目前在临床上已经广泛应用的S抗原定量的单位是IU/ML，特别是在治疗过程中S抗原定量水平可以逐渐下降（以干扰素治疗更明显），可以和DNA定量水平一起指导临床治疗。初步研究的结果显示，对于干扰素治疗的e抗原阳性的慢性乙型肝炎来说，治疗24周S抗原定量<1500IU/ml，就应该继续单药治疗，且e和s抗原消失和血清转换的比例都会很高，相反如果s抗原定量仍然>20000IU/ml，且HBV DNA>5log，就应该改变治疗策略。治疗第48周时HBsAg水平降低情况是治疗结束后3年随访期间HBsAg清除的预测因素。若HBsAg水平下降不明显（部分应答或不应答），可考虑延长疗程或联合治疗，以进一步提高HBeAg血清转换率和HBsAg清除率。慢性乙型肝炎患者经过抗病毒治疗后，HBsAg下降速度和幅度是不同的，HBsAg下降速度快、幅度大代表治疗的效果好，同时还可预测患者的持久应及长期随访时HBsAg的清除率。在PEG-IFNα-2a治疗研究结果显示治疗12周时，若HBsAg定量<1500 IU/mL（约占治疗人群的32%），治疗结束停药1年时HBeAg血清转换率可高达51%（66/129），HBsAg定量1500-20000 IU/mL（约占治疗人群的52%），HBeAg血清转换率仍可达32%（53/166），相反如果HBsAg定量仍然>20000 IU/mL（约占治疗人群的16%），治疗结束停药1年时HBeAg血清转换率仅仅为19%（8/43）另外HBsAg下降速度和幅度还与它的长期清除率有关，在24周HBsAg <1500 IU/mL 且同时出现HBeAg血清转换的患者中20%获得HBsAg清除。
　　目前HBeAg检测方法主要有酶免疫法、化学发光法（如微粒子化学发光、电化学发光）等，大部分属于定性或半定量检测，定性结果表示为“阴性”或“阳性”，半定量结果以样本吸光度与临界值比值（S/CO）或临界值指数（COI）等形式表示。随着实验技术的进展，近年来出现了定量HBeAg检测试剂。根据HBeAg S/CO值或COI值在一定范围之内与HBeAg含量呈线性相关的原理，以德国保罗埃利赫研究所（PEI）提供的HBeAg参考物质制定标准曲线，从而实现HBeAg定量检测，结果以PEI U/ml表示。而目前e抗原的定量检测（PEI U/ml）的方法在临床上没有广泛应用，常用的e抗原检测方法仍然用s/c来表示，但研究显示s/c值和PEI U/ml之间有较好的线性关系，1个PEI U约等于4.7个s/c值。e抗原定量是评价抗病毒药物，无论是对干扰素，还是NAs对治疗都是一个非常有价值的指标。E抗原的定量值，如<100或10PEI U/ml，在疗效的判断上非常有意义。例如治疗24周后，如果e抗原定量仍然>100PEI U/ml，那么治疗一年的血清学转换率很低，仅有4%左右。相反，治疗24周，e抗原定量已经<10PEI U/ml， 治疗一年的血清学转换率可高达50%以上。因此，如果有条件在治疗前及治疗后的不同时间点均应做HBeAg定量检测，来指导临床治疗。
　　三、病毒及其血清学检测与治疗终点及停药后复发
　　治疗终点的确定取决于临床治疗指标的变化，目前已经被普遍接受的治疗终点都是根据现有的病毒和血清学指标来确定的。
　　理想的治疗终点(ideal endpoint of therapy)：即经过治疗出现持续的HBsAg消失伴/不伴HBsAg血清学转换。对于代偿性肝病来说，无论应用那种抗病毒药物，此时既可以停止治疗。适用于HBeAg阳性及HBeAg阴性的患者。
　　满意的治疗终点(satisfactory endpoint of therapy)：对于达不到理想的治疗终点的HBeAg阳性患者，出现持续的HBeAg血清学转换也是可以停药的指标。
　　可获益的治疗终点(desirable endpoint of therapy)：对于不能达到血清转换的HBeAg阳性和HBeAg阴患者，应用NRTI治疗应维持HBV DNA检测不到，应长期治疗，不能停药。而应用IFN治疗后持续的HBV DNA检测不到也是可以停药的。
　　值得一提的是，治疗结束时HBV DNA的水平一定是采用敏感的检测方法，即至少HBV DNA要小于<300copie/ml或15-60IU/ml，否则停药后很快会复发（特别是接受NAs治疗的患者），S/E抗原的消失和血清转换也是指以标准的定量检测方法来确定的。
　　治疗结束时HBsAg水平与治疗结束后的长期随访中HBsAg的消失密切相关，即治疗结束时HBsAg水平越低，在停药后随访中HBsAg的清除率越高。Brunetto的研究显示无论e抗原阳性还是e抗原阴性的慢性乙型肝炎，治疗48周时若HBsAg定量<10 IU/ml，占12%（23/194），停药随访3年，HBsAg消失率高达52%（12/23），相反如果HBsAg >10 IU/ml， 占88%（171/194），随访3年仅仅有2%（4/174）的患者出现HBsAg消失。同样治疗48周时HBsAg下降>2log， 随访3年，HBsAg消失率高达42%，下降<2log，仅仅有3%的患者HBsAg消失。因此，在治疗结束时，对于那些HBV DNA 阴转并出现e抗原血清转换的患者，如果HBsAg水平下降不明显，可考虑延长疗程，以进一步提高HBeAg血清转换率和HBsAg清除率。同样核苷（酸）类似物的治疗也可以看到同样的结果。例如今年欧洲肝病年会上报道替比夫定治疗应答的患者，特别是HBsAg快速下降的患者，连续治疗3年，HBsAg的阴转率可达26%。
　　治疗中HBsAg水平可以区分持续应答者和复发者慢性乙型肝炎抗病毒治疗后，尽管HBV DNA已经检测不到，甚至已经发生了e抗原的血清转换，但仍然有以部分患者在停药后出现复发。这样临床上就急需找到一个比较可靠的指标来预测停药后患者的复发情况。最近Moucari的研究显示，干扰素抗病毒治疗过程中，如果HBsAg水平持续下降，治疗1年停药随访患者的复发比例明显低于HBsAg持续高水平的患者。因此在未来的治疗中，不但在治疗过程中要监测HBsAg的定量水平，在治疗结束后还应继续监测以便早期发现复发患者。